Роль 7-гидроксиматаирезинола в противовоспалительной терапии гинекологических заболеваний

Помимо гормональных нарушений, одной из основных причин или важным сопутствующим фактором развития гинекологической патологии как доброкачественного, так и злокачественного генеза является хронический воспалительный процесс. Будучи закрепленным эволюцией в качестве обязательной реакции организма на инфекционные агенты или повреждение, воспаление может длительное время протекать латентно и на фоне угнетения функционального состояния и развивающейся толерантности иммунной системы переходить в хроническое состояние. Хронические воспалительные процессы, как правило, сопровождаются персистирующим, длительно сохраняющимся дисбалансом функционирования иммунитета, сниженным контролем элиминации мутантных, инфицированных вирусами клеток или клеток с нарушениями регуляции роста и деления, что может способствовать развитию доброкачественного и злокачественного роста.

К основным компонентам лечения гинекологических заболеваний относятся радикальные (хирургическое лечение) и консервативные (малоинвазивные манипуляции) подходы, которые в той или иной степени сказываются на иммунитете пациентов и могут значительно повлиять на процесс реабилитации.

В последнее время появились публикации о добавлении к основным методам лечения дополнительных факторов иммуномодулирующего, противовоспалительного, антиоксидантного действия. Методами хемореактомного анализа изучены свойства 7-гидроксиматаирезинола (7-HMR) [1]. Предполагаемый спектр биологической активности молекулы выявлен методами современной информатики путем оценки взаимосвязей «химическая структура» — «свойство вещества» в сравнении с контрольными молекулами (17-эстрадиол, фитоэстроген β-ситостирол, эпигаллокатехин-3-галлат) с использованием постулата постгеномной биомедицины о том, что молекулы любого лекарственного средства действуют как определенные метаболиты (вследствие наличия тех или иных сходств химической структуры) и, связываясь с теми или иными белками протеома, производят соответствующие данному лекарству эффекты. Совокупность имеющихся для исследуемой молекулы данных о взаимодействии с белками протеома, рассматриваемых в ходе проведения хемореактомного анализа, позволила сделать выводы о потенциальных эффектах молекулы 7-HMR, так как было выявлено значительное структурное сходство его с молекулами, обладающими противоопухолевым, антибактериальным, противовирусным, противовоспалительным, антиоксидантным и рядом других эффектов [2]. В некоторых исследованиях продемонстрировано иммуномодулирующее действие 7-HMR [3]. В этом аспекте интересным представляется использование 7-HMR у женщин с различной гинекологической патологией, проживающих на радиационно загрязненных после катастрофы на Чернобыльской АЭС территориях. Согласно нашим исследованиям, проводимым в рамках российско-белорусских программ по преодолению последствий чернобыльской катастрофы в рамках Союзного государства в 2015–2016 гг., у женщин, подвергшихся действию малых доз радиации, развитие гинекологической патологии часто сопровождается разного рода нарушениями иммунной системы, которые влияют на характер течения патологических процессов [4–6]. Предполагаемые свойства 7-HMR указывают на перспективность его использования в практике лечения заболеваний воспалительного генеза в качестве фактора, ускоряющего процессы восстановления реактивности организма после основного лечения.

В настоящей статье рассмотрены результаты длительного применения биологически активной добавки к пище (БАД) Лигнариус, содержащей активный компонент лигнан 7-HMR в качестве адъювантного средства, направленного на купирование системных проявлений воспалительного и супрессирующего характера, при лечении ги��екологической патологии.

Материал и методы исследования

В исследование включено 30 больных с различными гинекологическими заболеваниями, из которых были сформированы две клинические группы в соответствии с диагностированной патологией и методом лечения.

В 1-ю группу вошли 15 пациенток с неполным выпадением матки и влагалища 1-й степени. Возраст больных варьировал от 38 до 66 лет, в среднем составил 47,5 лет. У всех пациенток диагностировано неполное выпадение матки и влагалища (опущение стенок влагалища 1–2 степени), у 12 (80,0%) из них в сочетании с недостаточностью мышц тазового дна/зиянием половой щели. Всем больным 1-й группы проводилось мини-инвазивное вмешательство: восстановление стенок влагалища с использованием лазерных и филлерных технологий, предполагающее лазерную обработку слизистой влагалища во фракционном режиме и субмукозное введение в перинеальную/парауретральную область объемообразующих гелей.

2-я группа сформирована из 15 пациенток с доброкачественными и злокачественными новообразованиями женских половых органов. Возраст больных находился в диапазоне 42–67 лет, в среднем — 52,5 года. Среди доброкачественных опухолевых заболеваний миома матки диагностирована у 8 (53,3%) больных, новообразование яичника (дермоидная киста, цистаденома) — у 5 (33,3%). Внутриэпителиальный рак шейки матки верифицирован у 2 (13,3%) пациенток. Больным 2-й группы проведено хирургическое лечение: видеоэндоскопическая экстирпация матки с/без придатков (53,3%), резекция шейки матки (13,3%), видеоэндоскопическая аднексэктомия по поводу опухолей яичников (33,3%).

До лечения всем пациенткам проводилось полное клинико-радиологическое и лабораторное обследование, включающее в том числе и оценку уровня цитокинов в исходном статусе.

После проведенного специализированного лечения больные принимали в адъювантном режиме Лигнариус, содержащий 30 мг действующего вещества — 7-HMR, по схеме: 1 капсула в сутки в течение 60 дней. После окончания приема Лигнариуса для характеристики остроты и продолжительности воспаления и супрессии иммунитета использована оценка уровня цитокинов (интерферонов и интерлейкинов), оказывающих содействие в индукции, развитии и разрешении острых и хронических воспалительных реакций, а также в развитии и прогрессии опухолевого роста. Оценены спонтанные уровни цитокинов острой и хронической фазы воспаления (ИФН-α, ИЛ-6, ФНО); противовоспалительные цитокины, цитокины-регуляторы, изменяющие баланс реакций клеточного и гуморального иммунитета (ИЛ-10, ИЛ-4, ИФН-γ); основной ростовой фактор клеток (ИЛ-2); учет состояния которых в определенной степени может служить индикатором здоровья женщин [7].

Определение цитокинов осуществляли с помощью твердофазного иммуноферментного метода, используя тест-системы производства ЗАО «Вектор-Бест» (Новосибирск) по предлагаемым разработчиками методикам.

Статистическая обработка результатов выполнена с помощью пакета программ Statistica 8.0 (Stat Soft, Inc., США) для персонального компьютера методами параметрического и непараметрического анализа с использованием t-критерия Стьюдента и U-критерия Манна–Уитни.

Результаты лечения

Характеристика исходного системного уровня цитокинов в крови пациенток с заболеваниями гинекологического профиля

Проведена оценка исходного статуса цитокинов (пг/мл) обеих групп пациенток до начала лечения. Результаты отражены в таблице.

Хроническая активация иммунной системы у пациенток с гинекологическими заболеваниями проявляется в том, что средние групповые значения спонтанного уровня цитокинов (М) превысили нормативные значения практически по всем используемым цитокинам в следующей последовательности: ИЛ-10, ИФН-γ, ИФН-α, ИЛ-4, ФНО, ИЛ-2, ИЛ-6. За исключением ИЛ-6, концентрация которого находится в диапазоне среднестатистической нормы.

В целом степень спонтанного системного реагирования носит нерезко выраженный характер. Повышение в сыворотке крови такого комплекса цитокинов, несомненно, отражает широкий спектр способов защиты от внешних и внутренних антигенов бактериального, вирусного, паразитарного и онкологического происхождения, используемых организмом при развитии гинекологических заболеваний. В иммунный ответ вовлечены реакции неспецифического и специфического иммунитета, выявляется их конкуренция и взаимодействие. Наиболее повышен уровень ИЛ-10. При его уровне, превышающем 10 пг/мл, у части пациенток отмечается более низкий уровень воспаления за счет снижения провоспалительного цитокина ФНО (коэффициент корреляции, r = –0,40), продуцируемого моноцитами и макрофагами. В то же время при более высоком уровне ИЛ-10 чаще отмечается повышение ИЛ-4, т. е. вовлекается гуморальный путь иммунного ответа, обеспечиваемый Тh2 (корреляция уровней ИЛ-10 и ИЛ-4; r = 0,63). Повышенный уровень ИЛ-10 коррелирует также с некоторым повышением ИФН-α (корреляция уровней ИЛ-10 и ИФН-α; r = 0,49). Такие случаи можно интерпретировать как сочетание супрессии, индуцированной ИЛ-10, с активацией лейкоцитов, продуцирующих ИФН-α.

Необходимо отметить, что активация специфического иммунного ответа по Тh1-пути (рост ИФН-γ) в 95% случаев происходит параллельно с активацией лейкоцитов с возрастанием уровня ИФН-α, а также повышением продукции ростового фактора ИЛ-2 активированными лимфоцитами (r = 0,45, ИФН-α и ИЛ-2). Высокий уровень ИФН-γ на антиген-специфической фазе ответа через Тh1-путь обеспечивает активацию иммунитета по клеточному пути, защищая от внутриклеточных патогенов, т. е. убирая мутировавшие, инфицированные вирусами и другими патогенами клетки.

Таким образом, исходное повышение уровня цитокинов в периферической крови женщин с гинекологической патологией можно охарактеризовать как системную хроническую воспалительную реакцию, обусловленную участием неспецифического и специфического противомикробного, противовирусного, противоопухолевого иммунного ответа.

Анализ динамики цитокинов у больных с различной гинекологической патологией после применения лигнана 7-HMR

Выполнен анализ динамики уровня цитокинов у больных с различной гинекологической патологией, которые после малоинвазивного или хирургического лечения длительно принимали лигнан 7-HMR.

Характер действия длительного 60-дневного приема лигнана 7-HMR на системность проявления иммунных реакций в общей группе пациенток представлен на рис. 1.

В общей группе пациенток после продолжительного приема лигнана 7-HMR отмечена выраженная статистически значимая динамика ряда цитокинов с модулирующим вектором действия: снижение концентрации и внутригруппового разброса показателей. С учетом влияния фактора времени на счет эффекта лечения следует отнести статистически значимое снижение повышенных концентраций ИЛ-10, ИФН-γ, ИЛ-2, а также ИЛ-6 (для всех четырех цитокинов р < 0,05), которое можно интерпретировать как снижение системного хронического воспалительного реагирования. При этом концентрация ИЛ-6 (острофазный цитокин) и ИЛ-10 (регулирующий цитокин, преимущественно погашающий высокий уровень иммунного реагирования) не превышает их уровня у практически здоровых людей.

Остаются несколько повышенными ИФН-α (продуцируется лейкоцитами, участвует в противовирусном иммунном ответе), ИЛ-4 (преимущественно продуцент активированных Тh2, поддерживающий гуморальный путь иммунного ответа) и ФНО (продуцируется в основном моноцитами и макрофагами, ростовой фактор участвует в развитии воспалительных и иммунных реакций). Эти цитокины участвуют в реализации разных путей противовирусной и противоопухолевой защиты. После выполненного оперативного или малоинвазивного лечения на фоне длительного приема лигнана 7-HMR (Лигнариус) происходит снижение их уровня, обусловленное ликвидацией внутриклеточных и циркулирующих в крови агентов, включающих антигены вирусного и онкологического генеза.

Динамика индивидуальных показателей цитокинов после 60-дневного приема лигнана 7-HMR

Динамика индивидуальных показателей спонтанной продукции цитокинов после 60-дневного приема лигнана 7-HMR представлена на рис. 2.

Как следует из представленных данных, индивидуальный уровень ИЛ-10 (рис. 2А), ИЛ-2 (рис. 2Г) и ИФН-γ (рис. 2Д) снизился после лечения практически у всех женщин, обследованных до и после лечения.

Концентрация ИЛ-6 (рис. 2Б) и ИЛ-4 (рис. 2В) снизилась у большинства женщин с небольшими исключениями. В то же время динамика ФНО (рис. 2Ж) и ИФН-α (рис. 2Е) была противоположной: у большинства женщин наблюдалось некоторое повышение ее концентрации, снижение уровня ФНО наблюдалось лишь у 9,5%, а уровня ИФН-α — лишь у 14,3% больных. Эта динамика, вне сомнения, отражает нормализацию, выравнивание процессов супрессии и активации врожденного и специфического звеньев защиты, что может более точно определено при сопоставлении с участвующими в реакциях популяциями клеток.

Исследование преобладающего действия лигнана 7-HMR на динамику цитокинов в общей группе больных с различными гинекологическими заболеваниями

В настоящее время принято считать, что преобладание активации или супрессии иммунного ответа определяется не только уровнем супрессирующих или активирующих иммунный ответ цитокинов, но и их соотношением. Для примера, нами вычислены индивидуальные соотношения супрессии к острому воспалению по цитокинам ИЛ-10/ИЛ-6. Контрольные значения были получены соотношением средних значений нормы для практически здоровых людей (доноров крови). Нормальный уровень регуляции соотношения супрессирующего действия иммунных реакций с лейкоцитарным ответом наблюдается при соотношении ИЛ-10/ИЛ-6 = 5/2 = 2,5.

На рис. 3 приведена динамика этого показателя в исходном статусе женщин общей группы до и после лечения в сравнении с вычисленным контролем. Как следует из представленных данных, преобладание супрессии (соотношение ИЛ-10/ИЛ-6) снижается с 10,55 до 6,3, однако не у всех достигает нормальных значений (норма 2,5); у значительной части пациенток сохраняется преобладание супрессии. В то же время динамика снижения супрессии статистически значима (р < 0,05).

Для выяснения преобладающей тенденции — снижается супрессия за счет снижения уровня ИЛ-10 или изменяется острый ответ за счет изменения ИЛ-6 — изучены и представлены результаты, отражающие индивидуальную динамику соотношения супрессии иммунного ответа и воспалительной реакции острого типа — ИЛ-10/ИЛ-6 (рис. 4).

Представленные данные демонстрируют положительную динамику снижения супрессирующего влияния ИЛ-10: коэффициент ИЛ-10/ИЛ-6 снизился у 66,7% больных, не отмечено значимой динамики — у 14,3%, повысился — у 19%. Выявлено статистически значимое снижение супрессирующего действия цитокина ИЛ-10 (р < 0,05).

Таким образом, 7-HMR участвует в модуляции уровней ИЛ-10 и ИЛ-6: повышенный уровень супрессорного ИЛ-10 снижается значительно, а количество провоспалительного ИЛ-6 снижается в меньшей степени. Этот механизм отражен в статистически значимом снижении соотношения ИЛ-10/ИЛ-6 (р < 0,05).

Сравнительное исследование состояния сетевой реакции цитокинов в клинических группах после приема лигнана 7-HMR

Выполнено сравнение исходного и окончательного уровня цитокинов в двух клинических группах пациентов, различающихся по нозологии гинекологической патологии (доброкачественные или злокачественные опухолевые заболевания и воспалительные процессы), а также характеру проведенного основного лечения (хирургическое вмешательство или малоинвазивные манипуляции).

При сопоставлении исходного статуса общим для обеих групп является повышенный уровень ИЛ-10, вырабатываемого активированными Т-лимфоцитами, макрофагами, естественными киллерами и супрессирующего многие, особенно повышенные, реакции иммунного ответа (рис. 5).

В группе с хирургическим лечением исходные уровни этих цитокинов превышали их содержание в группе с малоинвазивным лечением. Более высокий уровень секреции супрессорного, противовирусных и противоопухолевых цитокинов отражает большую степень изменений иммунной защиты при опухолевом росте (доброкачественного и злокачественного типа) по сравнению с процессами неопухолевого генеза.

Для выявления особенностей реагирования иммунитета пациенток обеих групп (малоинвазивные манипуляции или хирургическое вмешательство) на прием лигнана 7-HMR изучены результаты состояния цитокиновой сети после 60-дневного приема, которые представлены на рис. 6.

Как следует из представленных данных, продолжительный срок приема лигнана 7-HMR в послеоперационном периоде сказался на снижении повышенных уровней ИЛ-10 и ИФН-γ в обеих группах пациенток, а в группе с хирургическим лечением онкологических заболеваний также снизился повышенный исходный уровень ИФН-α. Динамика снижения уровней ИЛ-10 и ИФН-γ в обеих группах и ИФН-γ в группе с хирургическим вмешательством статистически значима (р < 0,05). Влияние, оказываемое лигнаном 7-HMR на цитокиновую сеть, может быть уточнено при учете действия фактора времени, прошедшего после хирургических вмешательств и малоинвазивных мероприятий.

Таким образом, полученные предв��рительные результаты подтверждают наличие антисупрессивного и противовоспалительного эффектов длительного применения. Сходство основного действующего компонента лигнана 7-HMR с молекулами, обладающими противоопухолевым, антибактериальным, противовирусным, противовоспалительным и рядом других эффектов [1], ранее предсказанное в ходе хемореактомного моделирования свойств и продемонстрированное в исследовательских научно-практических разработках [2, 3], нашло свое подтверждение в клиническом исследовании.

Выводы

1. При изучении исходного профиля семи цитокинов (ИЛ-2, ИЛ-4, ИЛ-6, ИЛ-10, ИФН-α, ИФН-γ и ФНО) в периферической крови пациенток с различной гинекологической патологией (опухолевые и неопухолевые заболевания) повышение их уровня можно охарактеризовать как системную хроническую воспалительную реакцию, обусловленную участием неспецифического и специфического иммунного ответа в защите от бактериально-вирусной инфекции и мутационных изменений.
2. После продолжительного приема БАД Лигнариус в послеоперационном периоде у пациенток обеих групп отмечается положительная динамика уровней цитокинов: статистически значимое снижение повышенных концентраций ИЛ-10, ИФН-γ, ИЛ-4 и ИЛ-2 (для всех р < 0,05), которое означает положительную динамику уменьшения системного хронического воспалительного реагирования с направлением системной цитокиновой реакции в русло локальных местных процессов.
3. Сопоставление динамики супрессии (по ИЛ-10) и острофазного ответа (по ИЛ-6) выявляет значительную модуляцию супрессирующего влияния концентрации ИЛ-10 со снижением дисперсии индивидуальных показателей группы. В меньшей степени снижается уровень ИЛ-6, исходно находившийся в зоне нормальных значений. Динамика соотношения ИЛ-10 с уровнем ИЛ-6 (ИЛ-10/ИЛ-6) статистически значимо склоняется в сторону показателя нормы (р < 0,05), однако не сравнивается с ней.
4. Эффективность приема проявилась в статистически значимом снижении повышенного уровня ИЛ-10 и ИФН-γ в обеих группах пациенток — как с опухолевыми заболеваниями и хирургическим вмешательством, так и с неопухолевой патологией и малоинвазивным лечением. Кроме того, в группе с хирургическим лечением также снизился повышенный исходный уровень ИФН-α.
5. Лигнариус по схеме: 1 капсула (30 мг) в сутки в течение 60 дней) может быть рекомендован для включения в алгоритм лечения опухолевых и неопухолевых заболеваний женских половых органов в качестве противовоспалительного средства как после малоинвазивных манипуляций, так и обширных хирургических вмешательств.

Заключение

В результате проведенных исследований установлено, что лигнан 7-HMR обладает выраженным противовоспалительным действием. Наличие антисупрессивного и противовоспалительного иммунного эффекта, подтвержденное предварительными результатами клинического исследования, при хорошей переносимости, позволяет рекомендовать лигнан 7-HMR (Лигнариус) для включения в алгоритм лечения гинекологических заболеваний различного генеза.

Лигнан 7-HMR может быть включен в комплекс лечения доброкачественных и злокачественных опухолевых заболеваний, вирус­ассоцированной патологии (дисплазии различной степени тяжести, воспалительные заболевания и др.), в том числе после хирургических вмешательств.

Результаты исследования позволяют обосновать целесообразность применения лигнана 7-HMR (Лигнариус) в качестве средства, оказывающего положительное действие на функционирование защитных сил организма.

Литература

1. Torshin I. Yu. Bioinformatics in the post-genomic era: physiology and medicine. NovaBiomedicalBooks, NY, USA (2007), ISBN1–60021–752–4.
2. Торшин И. Ю., Громова О. А., Рубашкина А. Н., Федотова Л. Э. и др. Хемореактомный анализ 7-гидроксиматаирезинола указал на молекулярные механизмы осуществления фармакологических эффектов молекулы // Фармакокинетика и фармакодинамика. 2018, № 2 (личное сообщение, в печати).
3. Марко К., Франка М., Рамон К., Марко Д. Д., Марчелло Л., Сильвано П., Серхио Л. Иммуномодулирующая активность лигнана 7-гидроксиматаирезинола калия ацетата (7-HMR/лигнан™), полученного из ядра древесины ели европейской (Picea abies) // Международная иммунофармакология. 2010, 10, 339–343.
4. Кузьмина Е. Г., Мушкарина Т. Ю., Константинова Т. В., Курасова В. Г., Сироткина Н. П., Крикунова Л. И. Регуляторные Т-клетки, апоптоз Т-лимфоцитов и их взаимосвязь с развитием воспалительных и гиперпластических гинекологических заболеваний // Российский иммунологический журнал. 2016. T. 10 (19), № 4. С. 448–450.
5. Кузьмина Е. Г., Мушкарина Т. Ю., Константинова Т. В., Крикунова Л. И. Нарушения иммунитета при гинекологических заболеваниях (динамика от гиперплазий к новообразованиям) / Материалы конгресса «Новые технологии в диагностике и лечении гинекологических заболеваний». М., 2015. С. 53–54.
6. Кузьмина Е. Г., Мушкарина Т. Ю., Крикунова Л. И. Киллерные и регуляторные Т-клетки в периферической крови гинекологических больных с доброкачественными и злокачественными новообразованиями / Материалы 1-го Российского онкологического научно-образовательного форума с международным участием «Белые Ночи — 2015». М. С. 207.
7. Коршукова О. А., Шаркова В. А. Цитокины как иммунологические индикаторы здоровья женщин постменопаузального возраста // Pacific Medical Journal. 2007, № 4, p. 81–83.
8. Симбирцев А. С. Цитокины: классификация и биологические функции // Цитокины и воспаление. 2004. Т. 3. № 2. С. 16–22.
9. Демидов Л. В., Тимофеев И. В., Харкевич Г. Ю. Введение в биотерапию опухолей. М., 2006. С. 64.

МРНЦ им. А. Ф. Цыба — филиал ФГБУ НМИЦР МЗ РФ, Обнинск

¹ Контактная информация: krikunova_li@mail.ru

Роль 7-гидроксиматаирезинола в противовоспалительной терапии гинекологических заболеваний/ Е. Г. Кузьмина, Л. С. Мкртчян, Т. Ю. Мушкарина, О. Е. Ватин, Л. И. Крикунова
Для цитирования: Лечащий врач № 12/2018; Номера страниц в выпуске: 82-87
Теги: женщины, хроническое воспаление, иммунитет